Priama súprava RT-qPCR
Popis súpravy:
◮ Priama RT-qPCR súprava, využívajúca Foreasy reverznú transkriptázu a Foreasy HS Taq DNA polymerázu vyvinutú spoločnosťou Foregene, s jedinečným reakčným pufrom, robí túto súpravu so silnou rezistenciou a kompatibilitou a môže priamo testovať reakciu pomocou systému Foregene Lysis ako templátu.Táto súprava sa môže použiť na súpravu na detekciu nukleových kyselín COVID-19 a vývoj súpravy na detekciu nukleových kyselín pre iné patogénne baktérie.
Popis
Direct RT-qPCR Kit poskytuje samostatne balený RT-qPCR pufor a vysoko účinný enzýmzmes (Taq、M-MLV、RI), vďaka čomu je vhodná na vytváranie back-endových súprav a systémovúprava, v rámci jednoduchého overenia.
technické údaje
500 T, 50 000 T
Komponenty súpravy
| Obsah súpravy (20 μl reakčný systém) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Priama zmes enzýmov | 500 ul×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direct RT-qPCR Buffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Inštrukcia | 1 | 1 |
Prevádzkové kroky
Pred prípravou činidla by sa všetky činidlá v súprave mali rozmraziť pri izbovej teplote a jemne premiešať.
A: Pripravte sa of šablóna a činidlo
1. Pripravte si pripravenú RNA templát (odporúča sa použiť súpravu Foregene Total RNA Isolation Kit na extrakciu a purifikáciu RNA templátu) alebo produkt na krakovanie vzorky (odporúča sa použiť Foregene Lysis systém), špecifické priméry (10 μM) a ďalší relevantný spotrebný materiál, prístroj.
2. Vložte 2× priamy RT-qPCR pufer, ddH2O bez RNázy a 20× referenčné farbivo ROX (ak'potrebné) v škatuľke s ľadom, aby sa prirodzene roztopili a jemne premiešali.
B: Pripravte sa of RT-qPCR systému
Tabuľka 1 : Pripravte sa of RT-qPCR ssystém
| Komponent | Objem | Záverečné sústredenie |
| 2× Direct RT-qPCR Buffer | 10 μl | 1× |
| Priama zmes enzýmov | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Reverzný základný náter (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Šablóna (RNA alebo lyzát) | X ul | |
| 20x referenčné farbivo ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH20 | (6,4-X) ul | |
| Celkový objem | 20μL |
C: Set a RT-qPCR reakciu program
Tabuľka 2 : RT-qPCR reagovaťon program nastavenie (pre príklad: dva-krok metóda)
| Krok | Teplota | Čas | Cykly | Obsah | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Reverzná transkripcia |
| 2 | 95 ℃ | 1 minúta | 1 | Preddenaturácia | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturácia | |
| 60 ℃ | 30 sekúnd 2* | Žíhanie/Predlžovanie | |||
Skladovanie a trvanlivosť
-Súprava by sa mala skladovať pri -20± 5℃.Doba platnosti je 12 mesiacov.
-Vyhnite sa opakovaným cyklom zmrazovania a rozmrazovania (<5 cyklov).
