Súprava ForeDirect RT-qPCR
Popis súpravy:
◮Na priamu amplifikáciu RNA z odberov tampónov bez procesov čistenia RNA.Táto súprava dokončí cykly qRT-PCR do jednej hodiny.Enzýmová zmes je optimalizovaná zmes reverznej transkriptázy, Hot-Start Taq DNA polymerázy, inhibítora RNázy.Reakčný pufer obsahuje všetky požadované zložky, vrátane optimalizovaných zložiek pufra, Mg2+dUTP a dNTP.
Popis
Súprava ForeDirect RT-qPCR je určená na priamu amplifikáciu RNA z odberov tampónov v reálnom čase bez procesov čistenia RNA.Táto súprava dokončí cykly qRT-PCR do jednej hodiny.Enzýmová zmes je optimalizovaná zmes reverznej transkriptázy, Hot-Start Taq DNA polymerázy, inhibítora RNázy.Reakčný pufer obsahuje všetky požadované zložky, vrátane optimalizovaných zložiek pufra, Mg2+dUTP a dNTP.
technické údaje
100 T
Komponenty súpravy
| Činidlo uvoľňujúce nukleové kyseliny |
| RNA ochrana |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Enzýmová zmes (Taq&M-MLV) |
| Inštrukcie |
Aplikácia PCR
1. Po krátkom odstredení skúmaviek PCR ich vložte do nádoby na vzorky amplifikačného prístroja.
2. Tepelný protokol
| Krok | Teplota | Čas | Cykly | |
| 1 | Reverzná transkripcia | 50 ℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Preddenaturácia | 95 ℃ | 1 minúta | 1 |
| 3 | Denaturácia | 95 ℃ | 10 sekúnd | 42 |
| 4 | Žíhanie/Predlžovanie | 60 ℃ | 30 sekúnd | |
Poznámka:Fluorescenčný signál sa detegoval bezprostredne po predlžovacom kroku každého cyklu.
3. Po nastavení uložte súbor a spustite reakčný program.
Prevádzkové kroky
Pred prípravou činidla by sa všetky činidlá v súprave mali rozmraziť pri izbovej teplote a jemne premiešať.
Príprava činidla
1. Pripravte zmes na uvoľnenie nukleovej kyseliny
| Komponent | Hlasitosť na vzorku alebo ovládanie |
| Činidlo uvoľňujúce nukleové kyseliny | 5 μl |
| RNA ochrana | 0,5 μl |
2. Pripravte reakčnú zmes
| Komponent | Hlasitosť na vzorku alebo ovládanie |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 ul |
| Enzýmová zmes (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
| Priméry a sondy | 1 μl |
Skladovanie a trvanlivosť
-Súprava by sa mala skladovať pri -20± 5℃.Doba platnosti je 12 mesiacov.
-Vyhnite sa opakovaným cyklom zmrazovania a rozmrazovania (<5 cyklov).
