EndoFree Maxi Plasmid Kit (Spin Column)
Popis
Súprava EndoFree Maxi Plasmid Kit využíva jedinečnú techniku adsorpcie na silikagélovej membráne na efektívne a špecifickú väzbu plazmidovej DNA.Kombináciou špeciálneho endotoxínu Removal Buffer P4 a EndoFree Maxi Filtration Columns možno účinne odstrániť endotoxín, proteíny a iné nečistoty.Celý proces extrakcie trvá iba 1 hodinu, čo zaisťuje pohodlnú a rýchlu obsluhu.
Odporúčané množstvo baktérií pre každú prax: Pre plazmid s vysokou kópiou sa odporúča použiť 100 ml bakteriálneho kultivačného média, z ktorého výťažok je všeobecne okolo 500-1500 μg.Pre plazmid s malým počtom kópií sa odporúča 200 ml kultivačného média pre baktérie na vytvorenie približne 200-600 μg plazmidov.
Komponenty súpravy
Produkt Komponenty | D909-E(10 príprav) |
Pufr BL | 30 ml |
Buffer P1 | 100 ml |
Buffer P2 | 100 ml |
Buffer P4 | 100 ml |
Buffer DW2 | 44 ml |
Pufr EB | 30 ml |
RNáza A (10 mg/ml) | 1 ml |
Maxi otočné kolóny DNAPure | 10 ks |
Maxi filtračná striekačka FinePure | 10 ks |
Skúmavky na odber 50 ml | 10 ks |
Detekcia koncentrácie a čistoty plazmidovej DNA
Čistotu a koncentráciu extrahovanej plazmidovej DNA možno detegovať elektroforézou na agarózovom géli a ultrafialovým spektrofotometrom.Hodnota OD260 1 zodpovedá približne 50 μg/ml dvojvláknovej DNA.Hodnota OD260/OD280 purifikovanej plazmidovej DNA je všeobecne v rozsahu 1,7-1,9.Purifikovaná plazmidová DNA sa môže priamo použiť na experimenty s vysokými požiadavkami na čistotu, ako je transfekcia buniek alebo experimenty in vivo.
Aplikácia súpravy
Plazmidová DNA extrahovaná touto súpravou môže byť aplikovaná na rôzne rutinné operácie, vrátane enzymatického štiepenia, PCR, sekvenovania, ligácie, transformácie, ako aj transfekcie pre rôzne typy buniek.
Skladovanie a trvanlivosť
EndoFree Maxi Plasmid Kit možno skladovať pri izbovej teplote (15-25°C) v suchom prostredí až 12 mesiacov.Pred prvým použitím pridajte RNázu A do tlmivého roztoku P1, dobre premiešajte a skladujte pri 2-8°C.Zmes je možné skladovať stabilne dlhšie ako 6 mesiacov.