Čínsky výrobca pre 2× koncentrovaný premix pre nepurifikovanú vzorku Kvantitatívna PCR v reálnom čase Priama multiplexná sonda Qpcr Mix Plus U
Organizácia sa drží koncepcie postupu „vedecké riadenie, vysoká kvalita a účinnosť, najvyšší nákupca pre Čínu Výrobca 2× koncentrovaného premixu pre nepurifikovanú vzorku Kvantitatívnej PCR v reálnom čase Qpcr Mix Plus U, Naša činnosť sa venuje poskytovaniu zákazníkov významným a bezpečným produktom najvyššej kvality za agresívnu cenu, vďaka čomu je každý zákazník spokojný s našimi službami.
Organizácia sa drží koncepcie postupu „vedecké riadenie, vysoká kvalita a efektívnosť primátov, nákupca najvyšší preČína Taq DNA polymeráza a Qpcr, Naša spoločnosť má bohatú silu a má stabilný a dokonalý systém predajnej siete.Priali by sme si, aby sme mohli nadviazať dobré obchodné vzťahy so všetkými zákazníkmi z domova i zo zahraničia na základe vzájomných výhod.
Princípy návrhu primérov PCR v reálnom čase
Forward Primer a Reverse Primer
Pre Real Time PCR je veľmi dôležitý návrh priméru.Priméry súvisia so špecifickosťou a účinnosťou amplifikácie PCR a môžu byť navrhnuté s odkazom na nasledujúce princípy:
- Dĺžka priméru: 18-30 bp.
- Obsah GC: 40-60 %.
- Hodnota Tm: Softvér na návrh základného náteru, ako napríklad Primer 5, môže poskytnúť hodnotu Tm základného náteru.Hodnoty Tm upstream a downstream primérov by mali byť čo najbližšie.Môže sa použiť aj vzorec na výpočet Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Pri vykonávaní PCR sa ako teplota nasadenia vo všeobecnosti vyberie teplota pod hodnotou Tm priméru 5 °C (zodpovedajúce zvýšenie teploty nasadenia môže zvýšiť špecifickosť reakcie PCR).
- Priméry a produkty PCR:
- Dĺžka produktu amplifikácie PCR priméru je výhodne 100 až 150 bp.
- Navrhovaným základným náterom v sekundárnej štruktúrnej oblasti šablóny by ste sa mali čo najviac vyhnúť.
- Vyhnite sa tvorbe 2 alebo viacerých komplementárnych báz medzi 3' koncami upstream a downstream primérov.
- Primer 3′ terminálová základňa nemôže byť prítomná s 3 dodatočnými po sebe idúcimi G alebo C.
- Priméry samotné nemôžu mať komplementárne štruktúry, inak sa vytvorí vlásenková štruktúra, ktorá ovplyvňuje PCR amplifikáciu.
- ATCG by sa malo distribuovať čo najrovnomernejšie v sekvencii primérov a 3 'terminálna báza by sa mala vyhnúť ako T.
Dodatok1: Cell DirectRT-qPCR Komponent súpravyt doplnkové balenie
1. Roztok na lýzu buniek
Roztok na bunkovú lýzu | |||
Komponenty súpravy (24-jamkový lýzový systém / jamka) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Časťja | Pufr CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ČasťII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT zmes | |
Komponenty súpravy (20 μl reakčného systému) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNázy2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR mix | ||
Komponenty súpravy (20 μl reakčného systému) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× referenčné farbivo ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNázy2O | 1,7 ml | 10 ml |
Organizácia sa drží koncepcie postupu „vedecké riadenie, vysoká kvalita a účinnosť, najvyšší nákupca pre Čínu Výrobca 2× koncentrovaného premixu pre nepurifikovanú vzorku Kvantitatívnej PCR v reálnom čase Qpcr Mix Plus U, Naša činnosť sa venuje poskytovaniu zákazníkov významným a bezpečným produktom najvyššej kvality za agresívnu cenu, vďaka čomu je každý zákazník spokojný s našimi službami.
Čínsky výrobca preČína Taq DNA polymeráza a Qpcr, Naša spoločnosť má bohatú silu a má stabilný a dokonalý systém predajnej siete.Priali by sme si, aby sme mohli nadviazať dobré obchodné vzťahy so všetkými zákazníkmi z domova i zo zahraničia na základe vzájomných výhod.
Princípy návrhu primérov PCR v reálnom čase
Forward Primer a Reverse Primer
Pre Real Time PCR je veľmi dôležitý návrh priméru.Priméry súvisia so špecifickosťou a účinnosťou amplifikácie PCR a môžu byť navrhnuté s odkazom na nasledujúce princípy:
- Dĺžka priméru: 18-30 bp.
- Obsah GC: 40-60 %.
- Hodnota Tm: Softvér na návrh základného náteru, ako napríklad Primer 5, môže poskytnúť hodnotu Tm základného náteru.Hodnoty Tm upstream a downstream primérov by mali byť čo najbližšie.Môže sa použiť aj vzorec na výpočet Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Pri vykonávaní PCR sa ako teplota nasadenia vo všeobecnosti vyberie teplota pod hodnotou Tm priméru 5 °C (zodpovedajúce zvýšenie teploty nasadenia môže zvýšiť špecifickosť reakcie PCR).
- Priméry a produkty PCR:
- Dĺžka produktu amplifikácie PCR priméru je výhodne 100 až 150 bp.
- Navrhovaným základným náterom v sekundárnej štruktúrnej oblasti šablóny by ste sa mali čo najviac vyhnúť.
- Vyhnite sa tvorbe 2 alebo viacerých komplementárnych báz medzi 3' koncami upstream a downstream primérov.
- Primer 3′ terminálová základňa nemôže byť prítomná s 3 dodatočnými po sebe idúcimi G alebo C.
- Priméry samotné nemôžu mať komplementárne štruktúry, inak sa vytvorí vlásenková štruktúra, ktorá ovplyvňuje PCR amplifikáciu.
- ATCG by sa malo distribuovať čo najrovnomernejšie v sekvencii primérov a 3 'terminálna báza by sa mala vyhnúť ako T.
Dodatok1: Cell DirectRT-qPCR Komponent súpravyt doplnkové balenie
1. Roztok na lýzu buniek
Roztok na bunkovú lýzu | |||
Komponenty súpravy (24-jamkový lýzový systém / jamka) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Časťja | Pufr CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ČasťII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT zmes | |
Komponenty súpravy (20 μl reakčného systému) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNázy2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR mix | ||
Komponenty súpravy (20 μl reakčného systému) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× referenčné farbivo ROX | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNázy2O | 1,7 ml | 10 ml |
Návody na použitie: