Úvod:

Molekuly RNA môžu vo veľkej miere interagovať s inými biologickými molekulami, ako sú proteíny, DNA a RNA, a preto existujú v bunkách a organizmoch vo forme makromolekulárnych komplexov.Medzi nimi RNA-proteínové komplexy sú existencia a funkcia RNA Jednou z dôležitých foriem.RNA pull-down je klasická metóda na skríning a identifikáciu molekúl RNA, najmä interagujúcich proteínov molekúl lncRNA, a je uznávaná väčšinou výskumníkov a medzinárodných uznávaných akademických časopisov.Dnes sa s vami FORREGENE podelí o experimentálny princíp a technický postup sťahovania RNA, možno ho využijete

1. Experimentálny princíp technológie sťahovania RNA:

In vitro transkripcia a syntéza biotínom značenej cieľovej lncRNA alebo fragmentov lncRNA (vrátane fragmentov RNA používaných ako pozitívne a negatívne kontroly) a inkubujte s bunkovými extraktmi;použite magnetické guľôčky ukotvené avidínom na zber komplexov RNA-proteín alebo RNA-RNA. Po dôkladnom premytí sa komplex eluuje.Ak detegujete proteínovú cieľovú molekulu, ktorá interaguje s lncRNA, vykonajte proteínovú elektroforézu na produkte RNA-pull down, detegujte cieľový proteín farbením striebrom a narežte gél na hmotnostnú spektrometriu;tiež priamo vykonať verifikáciu Western blot na sťahovacom produkte;ak sa deteguje Pre cieľové molekuly RNA, ktoré interagujú s lncRNA, sa produkty RNA-pull down podrobia extrakcii RNA a vykoná sa špecifická detekcia qRT-PCR.

2. Proces experimentu technológie sťahovania RNA:

3. Technický servis pre stiahnutie RNA FOREGENE:

Bunková kultúra

Príprava bunkového extraktu z celkového/jadrového/plazmatického proteínu

RNA pull down experiment

SDS-PAGE elektroforéza, strieborné farbenie

Hmotnostná spektrometria a WB experimenty

Experimentálna správa

4. Experimentálny prípad

Nasledujúci obrázok ukazuje výsledky FJ Bio-Bio's RNA pull-down a detekcie SDS-PAGE elektroforézou, na ktorých červená šípka označuje rozdielový pás:

Výskumná skupina profesora Song Xu zo Sichuanskej univerzity nazbierala 15 rokov dlhodobej akumulácie v oblasti výskumu lncRNA.Foregene Bio a výskumná skupina profesora Song Xu spolupracovali na spustení technológie sťahovania RNA lncRNA, ktorá vám poskytne uspokojivý výsledok pre váš experiment.