Enzým Taq s horúcim štartom je široko používaný.V porovnaní s bežnou DNA polymerázou sa enzým Taq s horúcim štartom môže účinne vyhnúť určitej nešpecifickej amplifikácii a tvorbe primérových dimérov a môže účinne zlepšiť úspešnosť amplifikácie cieľového génu.Najmä v oblasti genetického testovania bol enzým Taq s rýchlym štartom identifikovaný ako povinná norma v tomto odvetví a obyčajná DNA polymeráza by sa nemala používať.Ako je možné vidieť z vyššie uvedeného, ​​enzýmy Taq s horúcim štartom sú široko používané.V súčasnosti je na domácom trhu veľa značiek hot-start Taq enzýmov, no nie je veľa hot-start Taq enzýmov s vysokou kvalitou.Ako by sme si mali vybrať, keď čelíme toľkým hot-start Taq enzýmovým produktom?

1. Vyberte enzým Taq s horúcim štartom s vysokou účinnosťou amplifikácie

Účinnosť amplifikácie PCR úzko súvisí s výkonom enzýmu Taq.Po optimalizácii dobrého systému enzýmovej reakcie Taq je účinnosť amplifikácie vyššia ako 95 % a rozsah amplifikácie počiatočného templátového množstva je široký.Uspokojivá amplifikácia môže byť dosiahnutá, keď je obsah cieľového génu nízky, a nie je ľahké sa otráviť, keď je množstvo templátu vysoké a exponenciálna amplifikačná perióda je dlhá.Pre enzým Taq so slabým výkonom, aj keď bol reakčný systém mnohokrát optimalizovaný, účinnosť amplifikácie je stále nižšia ako 90 %, tvar „S“ amplifikačnej krivky nie je zrejmý, sklon je malý a krivka je plochá.Keď je množstvo templátu nízke, nedá sa zosilniť a keď je množstvo templátu vysoké, efekt zosilnenia nie je ideálny.Preto je výber DNA polymeráz s vysokou účinnosťou amplifikácie rozhodujúci pre úspech PCR a qPCR.

2. Zvoľte hot-start Taq enzým so silným enzýmovým výkonom

Enzymatická sila enzýmu Taq súvisí s účinnosťou amplifikácie.Vo všeobecnosti platí, že čím silnejšia je enzymatická sila enzýmu Taq s horúcim štartom, tým dlhšia je perióda exponenciálneho rastu amplifikácie PCR, typickejšia krivka v tvare písmena S, tým vyššia hodnota fluorescenčného signálu a tým vhodnejšia na detekciu multiplexnou PCR.Značkové DNA polymerázy so slabou enzymatickou silou môžu vo všeobecnosti podporovať iba 2-plexové reakcie.Pri uskutočňovaní 3-plex reakcií je amplifikačná krivka nízka, hodnota fluorescenčného signálu nízka a neexistuje žiadna typická amplifikačná krivka, takže výsledky je ťažké posúdiť.

3. Vyberte enzým Taq s horúcim štartom s vysokou citlivosťou

Všeobecne povedané, DNA polymeráza má vysokú účinnosť amplifikácie a vysokú citlivosť, ale existujú aj nezrovnalosti.Ak je početnosť cieľového génu vo vzorke, ktorá sa má amplifikovať, nízka, odporúča sa otestovať amplifikačnú citlivosť enzýmu Taq.Najbežnejšou detekčnou metódou je uskutočnenie 10-násobného alebo 5-násobného gradientového riedenia fragmentu cieľového génového plazmidu, uskutočnenie PCR detekcie pri nižšom riedení a výber enzýmu Taq s horúcim štartom s vyššou citlivosťou detekcie.

Z vyššie uvedeného je zrejmé, že výskumníci si musia vyberať podľa vlastných experimentálnych požiadaviek a podmienok financovania.Najlepšie je urobiť amplifikačný experiment s gradientovým riedením na zistenie účinnosti amplifikácie a citlivosti enzýmu Taq s horúcim štartom.

Príklad Foregene's Taq DNA polymeráza:

Foreasy HS Taq DNA polymeráza

Popis

Foreasy HS Taq DNA Polymerase je DNA polymeráza exprimovaná v Escherichia coli inžinierskych baktériách technológiou génovej rekombinácie.Enzým je kombinovaný s unikátnym reakčným pufrom, vďaka čomu je produkt vysoko odolný a kompatibilný a môže priamo použiť lyzát vzorky (systém Foregene Lysis) ako templát pre detekčné reakcie.

Aplikácia

Kvalitatívna PCR a kvantitatívna PCR detekcia purifikovaných templátov a nepurifikovaných templátov.

Kontrola kvality

1. Nezistila sa žiadna exogénna nukleázová aktivita

2.PCR metóda na detekciu zvyškovej genómovej DNA bez hostiteľa

3. Dokáže efektívne amplifikovať jednokópiové gény v ľudskom genóme

4. Uchovávajte pri izbovej teplote týždeň, bez zjavných zmien aktivity

Podrobnosti o produkte: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/