Zrodenie PCR
PCR (Polymerázová reťazová reakcia)
Od vynálezu polymerázovej reťazovej reakcie ubehlo už viac ako 30 rokov.Za viac ako 30 rokov, po tom, čo množstvo vedcov z celého sveta neustále dopĺňa a zdokonaľuje, sa technológia PCR stala najrozšírenejšou a najčastejšie používanou a najdôležitejšou metódou základného výskumu v celej oblasti biologických vied.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR atď. vyvinuté na základe širokej aplikácie tradičnej technológie PCR, ako aj novovzniknutá digitálna PCR (digitálna PCR), výrazne obohatili výskumné metódy väčšiny vedeckých výskumníkov a výrazne urýchlili vývojový proces moderných vied o živote, najmä molekulárnej biológie, výrazne prispeli k štúdiu života a povahy ľudstva ako celku.
Chyby tradičnej technológie PCR
Komplexná separácia nukleových kyselín aextrakcia:
★ Tradičná technológia PCR: vyžaduje sa
★ Technológia odvodená od PCR: vyžaduje sa
★ Vzorky DNA a RNA: veľké rozdiely, náročné prevádzkové požiadavky
★ Nebezpečenstvo pre telo: toxické činidlá poškodzujú telo
Tradičná technológia PCR a technológia derivátov vyžadujú separáciu a čistenie nukleových kyselín
Akákoľvek biologická vzorka musí prejsť sériou komplikovaného a únavného spracovania vzoriek, aby sa získali vzorky nukleových kyselín, ktoré spĺňajú požiadavky technológie PCR.
Separácia a extrakcia DNA a RNA bola vždy základnou úlohou, ktorú musia príslušní vedeckí výskumníci opakovať každý deň.
Vzhľadom na obrovské rozdiely medzi vzorkami sú separačné a extrakčné procesy DNA a RNA tiež veľmi odlišné.Táto práca si vyžaduje vysokú úroveň technickej zdatnosti operátorov.Tradičné separačné a extrakčné techniky vyžadujú dlhodobý kontakt s niektorými vysoko toxickými chemickými činidlami.Spôsobí nezvratné poškodenie tela operátora a dokonca spôsobí priame poškodenie počas experimentu.
Pre tých, ktorí majú k dispozícii veľké množstvo vzoriek na štúdium, je separácia a extrakcia nukleových kyselín zároveň náročnou úlohou.
Súpravy na izoláciu a extrakciu nukleových kyselín na trhu sú teraz vyspelé a existuje veľa značiek, ale sú približne rovnaké.Či už ide o odstredivú súpravu silikagélovej membránovej kolóny alebo súpravu na metódu magnetických guľôčok, trvá to veľa času a je to nákladné.Okrem nákladov na súpravu existujú aj špeciálne požiadavky na laboratórne vybavenie.Automatizovaná pracovná stanica používaná pri metóde magnetických guľôčok je veľmi typické veľkokapacitné vysokohodnotné zariadenie, ktoré predstavuje pre laboratórium obrovské náklady.
V súhrne
Pred vykonaním experimentov PCR je predbežná úprava vzoriek pre výskumníkov nevyhnutnou a vždy bolesťou hlavy.Ako vyriešiť tento problém a či je možné uskutočniť PCR experimenty bez separácie a extrakcie nukleových kyselín, bolo vždy myslením väčšiny vedeckých výskumníkov a personálu klinických laboratórií.
Foregenovo riešenie
Po rokoch starostlivého výskumu technológie Direct PCR a súvisiacich súprav spoločnosť Forgene úspešne prelomila mnohé prekážky a úspešne dosiahla priamu PCR pre mnoho typov rôznych vzoriek so silnou odolnosťou a prispôsobivosťou, čo umožnilo výskumníkom zbaviť sa ťažkopádnej a nebezpečnej separácie a extrakcie nukleových kyselín.To výrazne zníži náročnosť práce každého, urýchli proces experimentu a ušetrí náklady na vedecký výskum a testovanie.
Forgene chápe a pozná DirectPCR
Po prvé, DirectPCR technológia je priama PCR technológia pre rôzne biologické vzorky tkanív.Za týchto technických podmienok nie je potrebné separovať a extrahovať nukleové kyseliny a vzorka tkaniva sa priamo použije ako objekt a pridajú sa priméry cieľového génu pre PCR reakciu.
Po druhé, technológia DirectPCR nie je len tradičnou technológiou amplifikácie templátu DNA, ale zahŕňa aj reverznú transkripčnú PCR templátu RNA.
Po tretie, technológia DirectPCR nielen priamo vykonáva rutinné kvalitatívne PCR reakcie na tkanivových vzorkách, ale zahŕňa aj reakcie qPCR v reálnom čase, čo vyžaduje, aby reakčný systém mal silnú schopnosť odolávať interferencii fluorescencie pozadia a antagonizovať endogénne zhášače fluorescencie.
Po štvrté, vzorky tkaniva cielené technológiou DirectPCR vyžadujú len uvoľnenie templátov nukleových kyselín a neodstraňujú proteíny, polysacharidy, ióny solí atď., ktoré interferujú s reakciou PCR.To vyžaduje, aby polymeráza nukleových kyselín a zmes PCR v reakčnom systéme mali vynikajúcu antireverzibilitu a adaptabilitu a mohli zabezpečiť aktivitu enzýmu a presnosť replikácie v zložitých podmienkach.
Po piate, vzorky tkaniva cielené technológiou DirectPCR neboli podrobené žiadnemu ošetreniu obohatením nukleovými kyselinami a množstvo templátu je veľmi malé, čo vyžaduje extrémne vysokú citlivosť a účinnosť amplifikácie reakčného systému.
Záver
Technológia DirectPCR je jedným z najdôležitejších technologických pokrokov a inovácií za posledných 30 rokov od zrodu technológie PCR.Forgene je a bude priekopníkom a inovátorom tejto technológie.
Aplikačná perspektíva technológie DirectPCR je veľmi široká.Neustále zlepšovanie a propagácia tejto technológie určite prinesie podvratné zmeny do vedecko-výskumnej a inšpekčnej práce.Toto je revolúcia technológie PCR.
Čas odoslania: Feb-21-2017
