Súprava na izoláciu vírusovej DNA a RNA Súpravy na prípravu extrakcie vírusovej DNA a RNA
technické údaje
50 príprav, 200 príprav
Izolačná súprava na extrakciu purifikácie nukleovej kyseliny vírusovej RNA využíva rotačnú kolónu a vzorec vyvinutý spoločnosťou Foregene, ktorý dokáže efektívne extrahovať vysoko čistú a vysokokvalitnú vírusovú RNA zo vzoriek, ako je plazma, sérum, bezbunková telesná tekutina a supernatant bunkovej kultúry.Súprava špecificky pridáva lineárny akrylamid, ktorý dokáže ľahko zachytiť malé množstvá RNA zo vzoriek.RNA-Only Column môže účinne viazať RNA.Súprava dokáže spracovať veľké množstvo vzoriek súčasne.
Celá súprava neobsahuje RNázu, takže purifikovaná RNA nebude degradovaná.Pufer viRW1 a pufer viRW2 môžu zabezpečiť, že získaná vírusová nukleová kyselina je bez proteínu, nukleázy alebo iných nečistôt, ktoré možno použiť priamo na následné experimenty molekulárnej biológie.
Komponenty súpravy
| Lineárny akrylamid |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| ddH bez RNázy2O |
| DNA/RNA stĺpec |
| Inštrukcie |
Vlastnosti a výhody
■ Prevádzka pri izbovej teplote (15-25 °C) počas celého procesu, bez ľadového kúpeľa a nízkoteplotného odstreďovania.
■ Kompletná súprava bez RNázy, nemusíte sa obávať degradácie RNA.
■ Vysoký výťažok nukleových kyselín: Stĺpec len s DNA/RNA a jedinečný vzorec dokáže efektívne čistiť DNA a RNA.
■ Veľká kapacita spracovania vzoriek: zakaždým je možné spracovať až 200 μl vzoriek.
■ Vysoká rýchlosť: jednoduchá obsluha a dá sa dokončiť do 20 minút.
■ Bezpečnosť: nevyžaduje sa žiadne organické činidlo.
■ Vysoká kvalita: Purifikované fragmenty RNA majú vysokú čistotu, neobsahujú proteín a iné nečistoty a môžu spĺňať rôzne následné experimentálne aplikácie.
Aplikácia súpravy
Je vhodný na extrakciu a purifikáciu vírusovej nukleovej kyseliny vo vzorkách, ako je plazma, sérum, bezbunková telesná tekutina a supernatant bunkovej kultúry.
Pracovný tok
Diagram
Skladovanie a trvanlivosť
■ Túto súpravu možno skladovať 24 mesiacov v suchom prostredí pri izbovej teplote (15-25 °C);ak je potrebné skladovať dlhší čas, možno ho skladovať pri teplote 2–8 °C.
■ Roztok lineárneho akrylamidu možno skladovať pri izbovej teplote 7 dní;po obdržaní súpravy ju vyberte a uložte pri teplote -20°C.
■ Po pridaní lineárneho akrylamidu do tlmivého roztoku DRL sa môže skladovať pri teplote 2 – 8 °C až 48 hodín.Použite hotové riešenie.
Sprievodca analýzou problémov
Nasleduje analýza problémov, ktoré sa môžu vyskytnúť pri extrakcii vírusovej DNA/RNA, dúfajúc, že vám to pomôže pri vašich experimentoch.Okrem toho pre iné experimentálne alebo technické problémy, ako sú prevádzkové pokyny a analýza problémov, máme vyhradenú technickú podporu, ktorá vám pomôže.Ak máte nejaké potreby, kontaktujte nás: 028-83360257 alebo e-mail:
Tech@foregene.com.
Žiadna extrakcia nukleovej kyseliny alebo nízky výťažok nukleovej kyseliny
Zvyčajne existuje veľa faktorov, ktoré ovplyvňujú účinnosť regenerácie, ako napríklad: obsah nukleovej kyseliny vo vzorke, prevádzková metóda, elučný objem atď.
Analýza bežných príčin:
1. Počas postupu sa uskutočnil ľadový kúpeľ alebo centrifugácia pri nízkej teplote (4 °C).
Odporúčanie: Pracujte pri izbovej teplote (15-25°C) počas celého procesu, nepoužívajte ľadový kúpeľ a nízkoteplotné odstreďovanie.
2. Vzorka bola skladovaná nesprávne alebo bola skladovaná príliš dlho.
Odporúčanie: Vzorky skladujte pri -80°C a vyhýbajte sa opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu;skúste použiť čerstvo odobraté vzorky na extrakciu nukleových kyselín.
3. Nedostatočná lýza vzorky.
Odporúčanie: Uistite sa, že vzorka a pracovný roztok lýzy sú dôkladne premiešané a inkubované pri izbovej teplote (15-25°C) počas 10 minút.
4. Nesprávne pridanie eluentu.
Návrh: Uistite sa, že ddH2O bez RNázy sa pridáva po kvapkách do stredu membrány čistiacej kolóny a nekvapká ju na kruh čistiacej kolóny.
5. Do pufra RW2 sa nepridal správny objem absolútneho etanolu.
Návrh: Postupujte podľa pokynov, pridajte správny objem absolútneho etanolu do pufra RW2 a pred použitím súpravy dobre premiešajte.
6. Neprimeraný objem vzorky.
Návrh: 200 ul vzorky sa spracuje na každých 500 ul pufra DRL.Nadmerné spracovanie vzorky bude mať za následok nižší výťažok extrakcie nukleových kyselín.
7. Neprimeraný elučný objem alebo neúplná elúcia.
Odporúčanie: Objem eluentu čistiacej kolóny je 30-50 μl;ak elučný efekt nie je uspokojivý, odporúča sa predĺžiť čas pri izbovej teplote po pridaní predhriatej ddH2O bez RNázy, napríklad 5-10 minút.
8. Etanol zostáva na kolóne po premytí pufrom RW2.
Návrh: Ak po odstredení s pufrom RW2 počas 2 minút zostane etanol, kolónu možno po odstredení umiestniť na 5 minút pri teplote miestnosti, aby sa úplne odstránil zvyškový etanol.
Vyčistená nukleová kyselina je degradovaná
Kvalita purifikovanej nukleovej kyseliny súvisí s konzerváciou vzorky, kontamináciou RNázou, prevádzkou a ďalšími faktormi.Analýza bežných príčin:
1. Odobraté vzorky neboli včas uskladnené.
Odporúčanie: Ak sa vzorka po odbere nepoužije včas, ihneď ju uskladnite pri -80°C pri nízkej teplote.Na extrakciu RNA skúste použiť čerstvo odobraté vzorky.
2. Odoberte vzorky a opakovane ich zmrazte a rozmrazte.
Odporúčanie: Počas odberu a skladovania vzoriek zabráňte zmrazovaniu a rozmrazovaniu (nie viac ako raz), inak sa zníži výťažok nukleovej kyseliny.
3. Na operačnej sále je zavedená RNáza alebo sa nenosia jednorazové rukavice, masky a pod.
Odporúčanie: Experimenty s extrakciou RNA sa najlepšie vykonávajú v samostatnej operačnej miestnosti RNA a laboratórny stôl by sa mal pred experimentom vyčistiť.
Počas experimentu noste jednorazové rukavice a masky, aby ste sa v najväčšej miere vyhli degradácii RNA spôsobenej zavedením RNázy.
4. Činidlo bolo počas používania kontaminované RNázou.
Odporúčanie: Vymeňte za novú súpravu na izoláciu vírusovej DNA/RNA pre súvisiace experimenty.
5. Centrifugačné skúmavky a špičky pipiet používané na manipuláciu s RNA sú kontaminované RNázou.
Návrh: Uistite sa, že všetky centrifugačné skúmavky, špičky pipiet, pipety atď. používané na extrakciu RNA neobsahujú RNázu.
Purifikovaná nukleová kyselina ovplyvňuje následné experimenty
DNA a RNA čistené purifikačnou kolónou, ak je obsah iónov soli a proteínov príliš vysoký, ovplyvní to následné experimenty, ako sú: PCR amplifikácia, reverzná transkripcia atď.
1. Eluovaná DNA a RNA majú zvyškové ióny solí.
Návrh: Uistite sa, že sa do pufra RW2 pridal správny objem absolútneho etanolu a premyte čistiacu kolónu dvakrát pri rýchlosti odstreďovania špecifikovanej v návode na obsluhu;Vykonajte centrifugáciu, aby ste minimalizovali kontamináciu soľnými iónmi.
2. Eluovaná DNA a RNA majú etanolové zvyšky.
Návrh: Po potvrdení premytia pufrom RW2 vykonajte odstreďovanie prázdnej skúmavky pri rýchlosti odstreďovania uvedenej v návode na obsluhu;ak sú tam stále zvyšky etanolu, môžete odstrediť prázdnu skúmavku a potom ju umiestniť pri izbovej teplote na 5 minút, aby sa zvyšky etanolu odstránili v čo najväčšej miere.
Návody na použitie:
Návod na použitie súpravy na izoláciu vírusovej DNA a RNA
