Stále používate Trizol na extrakciu RNA?
Bože, nenechaj ma báť sa o tvoje zdravie!
Trizol sa chystá byť marginalizovaný, nehovorte mi, že ste stále v tme?

Hlavnou zložkou činidla Trizol je fenol a v experimentálnej prevádzke sa pridávajú aj organické činidlá, ako je chloroform.Dlhodobá expozícia poškodí vaše zdravie, najmä priamy kontakt s pokožkou môže spôsobiť vážne chemické popáleniny a trvalé jazvy.

Za normálnych okolností môžu partneri laboratória znížiť riziká len tým, že sa plne vyzbrojia (nosia laboratórne plášte, rukavice a masky).

A moja rada pre vás je: vymeňte Trizol priamo, aby ste predišli poškodeniu zdroja.

1. Produkt prvej generácie extrakcie RNA
Vyšiel v roku 1987 (činidlá Trizol)

výhoda:
Kompletnejšia extrakcia

Nevýhody:
Potrebné sú toxické činidlá, ako je guanidín izotiokyanát-fenol-chloroform;
Ťažká prevádzka;
Na odstránenie kontaminácie DNA je potrebné použiť DNázu

2. Produkt extrakcie RNA druhej generácie
Vyšiel v roku 1994 (QIAGEN RNeasy a väčšina domácich produktov)

výhoda:
Používa sa stĺpcová odstredivá metóda, ktorá sa ľahko ovláda;

Nevýhoda:
Je potrebné odstrediť, aby sa odstránili zvyšky tkaniva
Na odstránenie kontaminácie DNA je potrebné použiť DNázu

3.Tretia generácia produktu extrakcie RNA
Vyjde v roku 2005 (QIAGEN RNeasy Plus a Foregénprodukty série purifikácie RNA)

výhoda:
Priamo použite kolónu na odstránenie DNA na súčasné odstránenie DNA a zvyškov tkaniva, čo šetrí čas a námahu;
Bezpečné a pohodlné, nie je potrebné pridávať filtračnú kolónu a DNázu, aby sa ľahko odstránili nečistoty a zabránilo sa kontaminácii DNA

Pozrime sa na prevádzkové rozdiely medzi produktom prvej generácie (Trizol), produktom druhej generácie (RNeasy) a produktom tretej generácie (Foregene) extrakcie RNA:

Činnosť na obrázku je jasná: produkt tretej generácie má zjavné výhody

Stačí opísať tri slová: jednoduché!Rýchlo!Bezpečnosť

PK graf experimentálnych výsledkovpreprodukty prvej, druhej a tretej generácie extrakcie RNA:

1. Eelektroforetogram

Prvá generácia (1: Trizol)
Druhá generácia (2:QIAGEN RNeasy)
Tretia generácia (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Aký produkt je dobrý, zistíte porovnaním
RNA extrahovaná pomocou súpravy Foregene
Nielen vysoká koncentrácia, ale aj dobrá integrita

2.qPCR graf (graf krivky amplifikácie)

Prvá generácia (Trizol)

Druhá generácia (nebeská modráznamenáQIAGEN RNeasy-, červenáznamenáQIAGEN RNeasy +)

Tretia generácia (modrá znamená Foregene, zelená znamená QIAGEN RNeasy plus)

(Poznámka: Graf QIAGEN RNeasy druhej generácie qPCR znamená, že súprava nepridáva DNázu a neodstraňuje kontamináciu DNA. Preto je CT vyššia a výsledok nie je presný; QIAGEN RNeasy + znamená, že bola pridaná DNáza a kontaminácia DNA bola odstránená a výsledok je presný)

Či už ide o elektroforetogram alebo graf kvantitatívnej PCR amplifikačnej krivky, kvalita produktov Foregene nie je nižšia ako u produktov dovážaných zo zahraničia.