Lnc-RT Heroᵀᴹ I (s gDNázou) (Super Premix pre syntézu prvého vlákna cDNA z lncRNA)
technické údaje
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (s gDNázou) je systém reverznej transkripcie špeciálne vyvinutý pre lncRNA na rýchle odstránenie kontaminácie genómovej DNA.5×gDNase Mix dokáže rýchlo odstrániť zostávajúci genóm v RNA pri 42 °C počas 2 minút, čím sa účinne zabráni interferencii genómu s výsledkami qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix obsahuje Foregene LncRNA reverznú transkriptázu špeciálne vyvinutú spoločnosťou Foregene, čo je nový typ reverznej transkriptázy špeciálne pre lncRNA a iné dlhé RNA komplexné templáty, so silnejšou RNA afinitou a vyššou účinnosťou reverzného záznamu.Optimalizovaný systém zrýchľuje rýchlosť reverznej transkripcie a môže ľahko prepisovať RNA templáty s vysokým obsahom GC a komplexnou sekundárnou štruktúrou.Syntéza prvého vlákna cDNA môže byť dokončená pri 42 °C za 15 minút.
Komponenty súpravy
| 5× gDNázová zmes |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH20 bez RNázy |
| Inštrukcie |
Vlastnosti a výhody
■Efektívna schopnosť odstrániť gDNA, ktorá dokáže odstrániť gDNA v šablóne do 2 minút.
■ Dokáže účinne zvrátiť transkripciu lncRNA.Keď sa produkt reverznej transkripcie podrobí qPCR, hodnota Ct je nižšia ako hodnota konvenčného systému reverznej transkripcie.
■ Efektívny systém reverznej transkripcie, dokončenie syntézy prvého vlákna cDNA trvá len 15 minút.
■ Komplexné šablóny: šablóny s vysokým obsahom GC a zložitou sekundárnou štruktúrou môžu byť tiež obrátené s vysokou účinnosťou.
■ Vysoko citlivý systém reverznej transkripcie, šablóny na úrovni pg môžu tiež získať vysokokvalitnú cDNA.
■ Systém reverznej transkripcie má vysokú tepelnú stabilitu, optimálna reakčná teplota je 42℃a stále má dobrú reverznú transkripciu pri 50℃.
Aplikácia súpravy
lncRNA relatívna kvantitatívna analýza.
lncRNA absolútna kvantitatívna analýza.
Dokáže rýchlo a presne analyzovať stopovú RNA, ako je RNA vírus.
Reverzná transkripcia RNA templátov s vysokým obsahom GC alebo komplexnou sekundárnou štruktúrou.
Pracovný tok
Skladovanie a trvanlivosť
Súprava by sa mala skladovať pri -20°C. Produkt uchovávajte v chladničke s konštantnou teplotou -20 °C°C ihneď po prijatí.Ak sú podmienky skladovania vhodné, produkt počas 1-ročnej doby platnosti nezhorší žiadne vlastnosti.
Sprievodca analýzou problémov
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-špecifické zosilnenie
1. Nerozumný návrh základného náteru
Odporúčanie: Základné nátery navrhujte podľa zásad návrhu základného náteru.
2. Genómové zvyšky.
Návrh: Uistite sa, že teplota reakcie na odstránenie gDNA v prvom kroku je 42 °C a reakčný čas sa môže predĺžiť na 5 minút.
Žiadny zosilňovací signál pomocou RT-qPCR
1. RNA je degradovaná.
Odporúčanie: Materiál na extrakciu RNA by mal byť čo najčerstvejší a mala by sa použiť kvalitná a vysoko čistá RNA.
2. RNA obsahuje inhibítory.
Odporúčanie: Inhibítory reverznej transkripcie vo všeobecnosti zahŕňajú SDS, guanidínové soli, EDTA atď. Odporúča sa premyť zrazeninu RNA 70% etanolom, aby sa odstránili inhibítory.
3. Problémy návrhu základného náteru.
Odporúčanie: Podľa princípu návrhu základného náteru prepracujte základný náter na kontrolu.
Cieľový pás sa zobrazí v prázdnom ovládacom prvku
1. Kontaminácia prevádzkových nástrojov alebo činidiel.
Odporúčanie: Všetky činidlá alebo vybavenie pre experiment by mali byť autoklávované.Pri manipulácii buďte opatrní a opatrní, aby ste zabránili nasatiu vzoriek DNA do pipety alebo vyliatiu z centrifugačnej skúmavky.
2. Ku kontaminácii došlo počas prípravy reakčného systému PCR.
Odporúčanie: Pri manipulácii urobte potrebné opatrenia, ako napríklad: noste latexové rukavice, používajte špičky s filtrom.Použite Real Time PCR Mix v systéme odolnom voči kontaminácii.
3. Priméry sú znehodnotené.
Návrh: Použite elektroforézu SDS-PAGE na zistenie, či sú priméry degradované, a nahraďte ich novými primérmi pre experimenty s detekciou fluorescencie.
Návod na použitie:
Lnc-RT HeroTM I (s gDNázou) (Super Premix pre syntézu prvého vlákna cDNA z lncRNA) Návod na použitie
