Protokol súpravy Animal Tissue Direct PCR (bez nástrojov na odber vzoriek).
Popis súpravy:
Priamo použite lyzát živočíšneho tkaniva ako templát pre PCR amplifikáciu, bez oddelenej extrakcie DNA, rýchlo a s vysokou citlivosťou.
◮Nie je potrebné žiadne časovo náročné a drahé čistenie DNA.
◮Dopyt po vzorke je malý, stačí vziať jedno semeno.
◮Nevyžadujú sa žiadne špeciálne úpravy, ako je mletie a drvenie, a obsluha je jednoduchá.
◮Optimalizovaný systém PCR umožňuje, aby PCR mala vyššiu špecifickosť a silnejšiu toleranciu voči inhibítorom PCR reakcie.
Popisy
Táto súprava využíva jedinečný systém lyzačného pufra na rýchle uvoľnenie genómovej DNA zo vzoriek živočíšneho tkaniva pre reakcie PCR, takže je obzvlášť vhodná na rozsiahle genetické testovanie.
Proces uvoľnenia genómovej DNA z lyzačného pufra je dokončený v priebehu 10-30 minút pri 65 °C.Nevyžadujú sa žiadne ďalšie procesy, ako je odstraňovanie proteínov a RNA, a uvoľnená stopová DNA sa môže použiť ako templát pre reakciu PCR.
2× PCR EasyTMMix má silnú toleranciu voči inhibítorom PCR reakcie a môže použiť lyzát vzorky, ktorá sa má testovať, ako templát pre účinnú a špecifickú amplifikáciu.Toto činidlo obsahuje Foregene D-Taq DNApolymerázu, dNTP, MgCl2, reakčný pufor, PCR optimalizátor a stabilizátor.
D-Taq DNA polymeráza je DNA polymeráza špeciálne vyvinutá spoločnosťou Foregene pre priame PCR reakcie.D-Taq DNA polymeráza má silnú toleranciu voči rôznym inhibítorom PCR reakcie a môže účinne amplifikovať stopové množstvá DNA v rôznych komplexných reakčných systémoch a rýchlosť amplifikácie môže dosiahnuť 2 kb/min, čo je obzvlášť vhodné pre priamu PCR reakciu.
technické údaje
50 × 20 μl rxns, 200 × 20 μl rxns, 500 × 20 μl rxns, 2000 × 20 ul rxns
Komponenty súpravy
| Časť I | Pufer AL |
| Foregene Protease | |
| 6× DNA Loading Buffer | |
| Časť II | 2× PCR EasyTMZmiešať |
Vlastnosti a výhody
■Žiadne časovo náročné a drahé čistenie DNA
■ Požiadavka na vzorku je malá, možno testovať len 5 mg živočíšneho tkaniva.
■ Nevyžaduje sa žiadna špeciálna úprava, ako je mletie a drvenie, a obsluha je jednoduchá.
■ Optimalizovaný systém PCR spôsobuje, že PCR má vyššiu špecifickosť a silnejšiu toleranciu voči inhibítorom PCR reakcie.
Parametre súpravy
Použitie: rôzne živočíšne tkanivá.
DNA uvoľnená z lýzy vzorky: používa sa len ako templát PCR.
Súpravu je možné použiť na nasledujúce účely: identifikácia transgenózy, genotypizácia zvierat atď.
Pracovný tok
Skladovanie a trvanlivosť
Časť I tejto súpravy by sa mala skladovať pri 2-8℃.
Činidlo Buffer AL sa môže skladovať 12 mesiacov v suchom prostredí;môže sa skladovať pri 2-8℃pre dlhšie skladovanie.
Reagent Foregene Protease má jedinečný vzorec.Aby ste zabezpečili jeho aktivitu a stabilitu, uložte ho na 4℃na 12 mesiacov.
Činidlo 6×DNA Loading Buffer môže byť uložený na 4℃alebo -20℃na dlhú dobu.
Časť II tejto súpravy by sa mala skladovať pri -20 °C℃.
Činidlo 2×Jednoduchá PCRTMZmes je možné skladovať 12 mesiacov pri -20 °C℃;ak sa používa často, možno ho uložiť aj na 4℃na krátkodobé skladovanie (spotrebujte do 10 dní).
